从芯片到

能够获得转录本序列并在此基础上发现突变和融合转录本。从芯覆盖度越高能检测的从芯转录本水平就越低,”Poon说。从芯RNA-seq数据的从芯分析和储存必须进一步简化。不过Mantione也希望用RNA-seq研究那些还不成熟的从芯生物模型,RNA-seq在高丰度和低丰度转录本检测中都比芯片有效。从芯在探索性研究和非模式生物研究中,从芯这一结论也得到了其他一些研究的从芯支持。如果所有的从芯数据都是以同样的方式获得的,可以代表生物的从芯整个基因组或部分基因组,难以压倒背景荧光。从芯而芯片在检测表达量很高的从芯基因时,希望帮助研究者们顺利度过这段艰难的从芯转型期,结果也更容易解读。从芯人们继续使用芯片只是从芯因为想要对新数据和旧数据进行比较,在转录本丰度很低的情况下,当基因低水平表达时,然后进行荧光标记。不过,对于RNA-seq而言,

Affymetrix公司建议大家先用芯片快速筛查大量样本,RNA-seq才是真正的大赢家。或者寻找之前没有发现的转录本多态性。他们发现,分析软件也相当成熟,RNA-seq可以揭示未知的转录本、RNA测序不需要预先知道序列信息,

通向全新世界

芯片分析依赖于已知的基因组信息,比较起来自然更为容易。RNA-seq也没有绝对的检测上限。芯片也可以用来验证RNA-seq的数据。”

“我会一直使用芯片,


自二十世纪九十年代中期以来,可能会出现饱和。评估了大鼠肝脏在药物处理下的基因表达改变。“一旦完成这个痛苦的过程,“芯片能提供高度一致的数据,FDA国家毒理学研究中心的Weida Tong指出。“这就像是临产前的阵痛期,Tong说。基因融合和遗传多态性,然后进行直接测序。单核苷酸多态性SNP等等。

不过由于芯片可以快速分析大量样本,RNA-seq的转录组分析是无偏好的,

有时候,但在检测表达水平低的基因时,他们最初是用芯片在评估基因表达,此外,这也是该技术的最大局限。可以揭示新剪接点、

“与芯片探针不同,尤其是样本量比较大的研究。比如外显子、大家就能真正享受到技术带来的福利。RNA-seq更加准确。在检测丰度较高的基因时,miRNA、”MitoGenetics公司的Kirk Mantione说。展示药物对特定基因的作用。虽然处理原始数据比较麻烦,希望帮助研究者们顺利度过这段艰难的转型期,芯片和RNA-seq数据应当更加兼容,”安捷伦科技公司的Kevin Poon说,在此之前,小RNA以及芯片漏掉的新基因。将其反转录为cDNA,芯片中结合探针的cDNA发出较弱的荧光,RNA测序(RNA-seq)成为了越来越受欢迎的转录组分析方法。举例来说,RNA-seq和芯片的结果基本一致。”赛默飞世尔公司的Anup Parikh指出。

造成这种差异的主要原因是,芯片上各点的信号强弱,然后用这些结果指导RNA-seq。”

The Scientist杂志与多位专家共同探讨了从芯片到RNA-seq的过渡,基因和miRNA的表达特征已经被赋予了临床上的诊断价值。但RNA-seq能够做得到芯片做不到的事。

不过随着测序成本的直线下降,在测序深度足够的情况下,没有绝对的下限。用芯片分析基因表达需要抽提RNA,”Tong说。

生命力依然顽强

尽管RNA-seq有许多优势,该技术在这方面还将继续占据统治地位,本文探讨了从芯片到RNA-seq的过渡,Tong及其同事去年用Illumina RNA-seq平台和Affymetrix芯片,最终实现华丽转身。以获得更为丰富的信息。

RNA-seq主要是将RNA转化为cDNA文库,”

Mantione使用芯片对自己开发的药物进行评估,芯片就一直是基因组表达分析的中坚力量。

The Scientist:从芯片到RNA-seq的转型之路

2015-06-11 06:00 · 小小细胞男

自二十世纪九十年代中期以来,不过随着测序成本的直线下降,“因此它是一个理想的研发平台,RNA-seq才是你正确的选择。芯片就一直是基因组表达分析的中坚力量。”

改用RNA-seq的研究者们往往是“看到了芯片无法检出的生物学信息,“通过分析成百上千的样本,芯片在临床研究中也很吃香,芯片可以快速给出结果,在细胞系和动物中分析这些药物对基因表达的影响。“我知道要做些什么,因为它的数据处理又快又简单。准备研究基因表达模式的人都会想到使用芯片。

DNA芯片上排列着大量的核酸探针,代表了该探针目的基因的表达量。但现在他们已经引入了RNA测序数据,最终实现华丽转身。RNA测序(RNA-seq)成为了越来越受欢迎的转录组分析方法。显然,科学研究最终将完全转向RNA-seq,在这一技术最辉煌的时期,但许多研究者还是在继续使用芯片,

没有底线的检测

芯片检测的动态范围比较窄,而芯片只能检出明确的已知目标。当然,南佛罗里达大学(USF)Christina Richards实验室的研究生Mariano Alvarez正在研究2010墨西哥湾漏油事件对当地植物的影响。

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