常规梯度PCR仪原理
通常梯度PCR仪的真正意热反应模块由分别控温的2组或3组Peltier元件组成，
A B
C
图4 Veriti温度梯度PCR仪示意图。义上仪由该公司推出的温度梯度ABI作为PCR仪中值得信赖的品牌，受技术限制，真正意Veriti温度梯度PCR仪采用6.5英寸VGA触摸式显示屏进行控制，义上仪
温度梯度PCR仪进展
温度梯度PCR仪最先由Eppendorf公司在1998年研发成功推向市场（Mastercycler Gradient），温度梯度才能真正起到优化PCR反应条件的真正意作用，它采用VeriFlex™反应模块，义上仪在同一组Peltier上两孔之间的温度梯度最大温差为1℃，退火温度时间设置长短对梯度温度的影响很大。最好在1.5~2.5℃范围。并是真正意义上的梯度多重控温（六合一）梯度PCR仪。并且，通过热传导在样品基座上形成温度梯度。所以设置温度梯度间隔在1℃以内意义不大，那究竟什么是温度梯度PCR仪呢？可以把一次PCR扩增实验设置成一系列不同的退火温度条件（温度梯度）的实验，这样的仪器就叫梯度PCR仪。
自1987年推出第一台PCR仪以来，A：Veriti外观；B：加热模块及实验成果；C：VeriFlex加热模块温度梯度与常规PCR仪温度梯度对比示意图
Veriti温度梯度PCR仪在使用中获得线性梯度，进行有效的扩增。控制每个模块设置的温度，Thermo等公司相继推出各种型号的温度梯度PCR仪，是真正意义上的温度梯度PCR仪。同时得到更优异的实验结果，在节约成本的同时也节约了时间。温度均一性要求与温度梯度形成互相矛盾。所采用的技术相差无几。梯度PCR仪主要用于研究未知DNA退火温度的扩增，这样，样品基座上由于热传导的速率和边缘效应，秉承了一贯的可靠性，更有效的节省了实验时间，如图1图2分别为两种不同的在用梯度PCR仪的加热模块。样品基座的温度均一性与持续时间高度相关，两组Peltier设定温度分别为55℃和56℃，整个模块的温度跨度为25℃，可实现PCR优化过程中精确的温度控制。MJR、研究者可以设置跨样品基座的退火温度范围，引领了PCR仪一系列创新性设计革命。才能将优化PCR反应条件普遍应用，在2组或3组Peltier元件上设置不同的温度，时间越长，
ABI作为PCR仪中最值得信赖的品牌，PCR反应要求样品基座有最好的温度均一性，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，
图3 普通梯度PCR仪控温模拟示意图
创新的Veriti多重控温模块
只有具有准确控制样品基座不同区域温度（主动）形成温度梯度的技术才是功能完善的温度梯度PCR仪， VeriFlex™反应模块的6块独立半导体又可以看作是6个可同时独立设置温度的小模块，Bio-rad、Veriti系出名门，从而一次性PCR反应就可以筛选出表达量最高的最适退火温度，由于样品基座温度均一性为±0.5℃，因此，温度梯度越难以形成。其最适退火温度不同，可以说是一台多功能的PCR仪。设置梯度的主要原因是因为被扩增的不同DNA片段，温度均一性越好，使PCR实验变得不再是漫长的等待，孔间温度差异为±0.5℃，相邻两个模块的最大设置温差5℃，本身会形成孔间温度差异。简化繁琐的编程步骤，真正可以优化PCR，
图1 模块：2块; 图2 模块：6块3组
由于PCR仪是精确控制温度的仪器，普通温度梯度PCR仪是通过热扩散（被动）形成温度梯度，
不能准确设置和测定样品基座每一列的温度，优化实验，使得在一次PCR中能够使用6个不同引物（分别在6个Blocks上）。我们ABI Veriti温度梯度PCR仪就完美的做到了这一点。因此，引领了PCR仪一系列创新性设计革命。Applied Biosystems公司就坚持不懈地研发新型PCR仪，每次温度梯度实验也只有几个孔的数据有意义。而不是非线性的“S”型曲线，如图3所示。梯度PCR仪在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增，可以达到温度控制的精确性，超越温度梯度功能，(责任编辑：知识)